糖化多种检测方法该如何选择

2023-07-05 15:03:22

现如今糖尿病在全球形式依旧严峻。《2021IDF全球糖尿病地图（第十版）》在2021年12月6号在国际糖尿病联合会官网发布，糖尿病已然成为21世界增速最快的全球突发性卫生事件之一，患病人数高达5.37亿人，其中以2型糖尿病为主。而在新发布的《2022IDF全球糖尿病地图》，2022年全球1型糖尿病患者有875万，其中152万人年龄在20岁以下。

中国拥有大量的2型糖尿病患者也有较多的1型糖尿病患者，作为全球糖尿病患者数第一的国家，将面临着非常严峻的糖尿病防控挑战。如何早期筛查糖尿病患者，减少患者死亡率，提高患者生活质量成为社会各界所关心的问题。

糖化多种检测方法该如何选择

糖化血红蛋白，简称：HbA1c，一种血红蛋白与葡萄糖进行非酶促反应结合的产物，生成是一个缓慢的，且不可逆的过程，生成量与血糖浓度、高血糖存在的时间以及红细胞寿命相关。HbA1c可以有效的反映过去8-12周体内平均血糖水平，且具有结构稳定的特点，在临床上也常用作糖尿病控制的监测指标。在《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》的诊断标准中也明确指出HbA1c为2型糖尿病诊断标准之一。

对于糖化血红蛋白有哪些常用的检测方法

1.离子交换高效液相色谱法

离子交换高效液相色谱法（HPLC）为检测HbA1c金标准，其具有操作简单、检测快速、精密度好的特点，对于长期保存的待测标本依然具有良好的稳定性，能够及时发现常见的血红蛋白变异体，非常适合大批量标本的同时测定[1]。

2.亲和色谱法

亲和色谱法又称为亲和层析法。该方法学使用硼酸和总糖化血红蛋白在层析柱处进行结合，非糖化血红蛋自直接流出层析柱并被测量，再经过山梨醇等二醇基的多邦基复合物加入后，将糖化血红蛋白洗脱下来并进行测量，最后计算比值。此方法简单易行，快速准确，结果可靠，试剂稳定，且不受异常血红蛋白(HbS、HbC、HbE等)干扰，方法测定为总糖化血红蛋白，允许用经验算法计算出“标准的 HbA1c”[1]。

3.电泳法

电泳法主要分为琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和毛细管电泳3种，检测原理都是基于血红蛋白所带电荷的不同，进而导致在电场中迁移速率不同而进行分离。通过光密度扫描，可精确测定出各组分的含量，通常以百分含量（%）表示[1]。

4.免疫化学法

利用血红蛋白B链糖化N末端的48个氨基酸残基作为抗体识别位点制备单克隆抗体，再利用抗原抗体结合反应而建立:离子捕获法、乳胶凝集免疫比浊法、胶乳凝集抑制法、酶免疫法、放射免疫法[1]。

5.酶法

使用蛋白酶切断糖化血红蛋白B链N末端的糖化甘氨酷谷氨酷胺,利用600nm与800nm的吸光度差求出Hb浓度，再经过过氧化物酶的作用下进行一些列的显色反应通过吸光度求出HbA1浓度，再进一步计算出HbA1c%。此方法适用于全自动生化分析仪上使用，具有快速，操作简单和成本低的特点。且与HPLC和免疫法具有良好的相关性[1]。

不同检测方法的影响因素

糖化血红蛋白的检测方法颇多，对于临床样本的抗干扰能力又各不相同，有研究发现：样本类型对于亲和层析法、HPLC法检测HbA1c无干扰；当乳糜微粒（CM）≥15000FTU时，免疫比浊法测定HbA1c有干扰；游离胆红素（F-Bil）、结合胆红素（C-Bil）≥121.3umol/L时酶法检测高浓度HbA1c有干扰；当F-Bil≥196.8umol/L、C-Bil≥121.3umol/L时，酶法检测低浓度HbA1c有干扰[2]。

糖化多种检测方法该如何选择

收集285名健康体检者以及住院就诊的115例糖尿病患者对离子交换HPLC法和亲和层析色谱法两种检测方法进行比对实验。最终实验结果表明，硼酸盐亲和色谱法测定HbA1c线性范围为4.0%-15%间平均CV分别为1.0% 和1.8%，与离子交换HPLC法比较具有高度相关性。本地区95%健康人群HbA1c分布区间为4.2%-6.0%；本法测定HbA1c切点为6.1%时，诊断糖尿病的敏感性为80.2%，特异性为87.6%，与文献[4]报告的结论接近[3]。

糖化多种检测方法该如何选择